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如何用qPCR法检测支原体污染
人阅读 发布时间：2023-05-06 09:29
| 实验方法原理 | PCR法的基本原理是酶促DNA合成反应，即在DNA模板、引物和脱氧核糖核酸存在下，经DNA聚合酶的作用，使DNA链扩增延伸。 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 优势 |
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| 实验材料 | 液体样本 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 试剂盒 | MycoSybr™ Mycoplasma qPCR Detection Kit (MycoSybr™ 支原体qPCR检测试剂盒根据《欧洲药典》第2.6.7章描述的支原体核酸扩增检测（NAT）指南检测细胞培养物和细胞培养衍生材料中的支原体种类。该检测使用聚合酶链反应（PCR）扩增多种支原体特有的靶点。) |
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| 仪器、耗材 | qPCR仪、超净工作台 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 实验步骤 | 1. 收集待测样本，如：细胞培养上清、培养基、血清、污染物表面擦拭液等。 注意：无需提取样品中的支原体基因组DNA。 2. 从冰箱取出检测试剂，室温融化，叩击混匀，离心机低速离心甩底。对于单个反应体系： 准备 PCR 反应管,配制反应体系如下表：
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| 结果解释 | 根据对照和未知样本的Ct和Tm值分析支原体的存在。 |
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